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文章背景簡(jiǎn)介

BACKGROUND INTRODUCTION

心肌纖維化是導(dǎo)致心律失常的重要結(jié)構(gòu)重構(gòu)過(guò)程，其過(guò)程包括了纖維成分構(gòu)成的變化和重新分布、心肌實(shí)質(zhì)細(xì)胞的凋亡以及被替代。這一過(guò)程既是對(duì)受損傷部位的修復(fù)過(guò)程，也是調(diào)節(jié)心肌幾何結(jié)構(gòu)來(lái)適應(yīng)新的生理功能狀態(tài)和減少新的機(jī)械、化學(xué)和電刺激的過(guò)程。這一適應(yīng)過(guò)程涉及心肌的細(xì)胞成分和細(xì)胞外基質(zhì)（ECM），其中的非細(xì)胞成分包含膠原以及各種纖維，而細(xì)胞成分則包括心臟成纖維細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞。

ECM主要由纖維狀膠原構(gòu)成，同時(shí)也包括層粘連蛋白、纖連蛋白、原纖蛋白等，這些成分構(gòu)成了基底膜和各種蛋白聚糖。Ⅰ和Ⅲ型膠原幫助維持心肌組織的結(jié)構(gòu)完整性和協(xié)助心肌細(xì)胞縮短成心室泵作用，基底膜維持細(xì)胞間的相互作用和細(xì)胞的黏附作用，蛋白聚糖被認(rèn)為在黏附和信號(hào)通路方面發(fā)揮著重要的作用。

在健康成人中，心臟成纖維細(xì)胞的數(shù)量維持在相對(duì)較低的水平，主要由間質(zhì)成纖維細(xì)胞和經(jīng)歷上皮間葉轉(zhuǎn)化的細(xì)胞所構(gòu)成。在病理?xiàng)l件下，心肌成纖維細(xì)胞大量地增加，其生理功能不僅僅是與ECM的代謝相關(guān)，還可能對(duì)房顫中的電重構(gòu)也有作用——因?yàn)樗鼈兏�周圍心肌�?xì)胞相比，電生理性質(zhì)上存在差異。成纖維細(xì)胞本質(zhì)上是非興奮細(xì)胞，但在體外可通過(guò)接合素能傳導(dǎo)心肌細(xì)胞間的電流，導(dǎo)致電流傳導(dǎo)產(chǎn)生異質(zhì)性，縮短動(dòng)作電位、靜息心肌細(xì)胞的去極化并誘導(dǎo)4期的自動(dòng)去極化。

肌成纖維細(xì)胞是在心肌纖維化中發(fā)揮重要作用的細(xì)胞。它們由心臟成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來(lái)，但其合成膠原的能力是心臟成纖維細(xì)胞的2倍以上。與心臟成纖維細(xì)胞比較，肌成纖維細(xì)胞不出現(xiàn)于健康心肌，而更多的是對(duì)促炎癥和纖維化刺激的應(yīng)答，以及能夠合成大量的各種細(xì)胞因子和趨化因子。

2017年，德國(guó)漢諾威醫(yī)學(xué)院Maria－Teresa Piccoli等人在 《Circulation Research》雜志（IF＝15．211；醫(yī)學(xué)1區(qū)）上發(fā)表發(fā)表了題為“Inhibition of the Cardiac Fibroblast–Enriched lncRNA Meg3 Prevents Cardiac Fibrosis and Diastolic Dysfunction ”的文章。

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所用到的主要方法

METHODS

1．橫向主動(dòng)脈收縮（TAC）

2．定量PCR

3．染色質(zhì)免疫共沉淀（CHIP）

4．RNA免疫沉淀（RIP）

5．蛋白質(zhì)印記分析（WB）

6．Picrosilius red 染色

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文章主要內(nèi)容摘要

ABSTRACT

當(dāng)心臟壓力超過(guò)負(fù)荷時(shí)，心臟成纖維細(xì)胞（CFs）會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）重塑，引起心肌纖維化和舒張功能障礙。近年來(lái)的研究已發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）在心臟病理學(xué)中扮演著很重要的角色。然而，關(guān)于lncRNA是如何調(diào)節(jié)心肌纖維化和心臟重塑的原因目前還不清楚。這篇文章主要研究了慢性壓力超負(fù)荷后小鼠心肌成纖維細(xì)胞（CFs）中l(wèi)ncRNA的表達(dá)特點(diǎn)，找出其中上調(diào)的lncRNA，并探討其功能及對(duì)心肌纖維化和舒張功能障礙的影響。 轉(zhuǎn)錄本測(cè)序后鑒定了幾種失調(diào)的轉(zhuǎn)錄本。其中，發(fā)現(xiàn)lncRNAMeg3（maternally expressed gene 3；母系表達(dá)基因3）主要由CFs表達(dá)，在晚期心臟重塑過(guò)程中的轉(zhuǎn)錄水平呈現(xiàn)下調(diào)。在體外，Meg3會(huì)調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白酶－2（MMP－2）。 應(yīng)用GapmeR技術(shù)沉默CFs中的Meg3會(huì)導(dǎo)致MMP－2的轉(zhuǎn)錄下調(diào)，這其中還依賴于p53的活性（不論TGF－β1缺失或存在）。CHIP實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步表明Meg3的沉默會(huì)通過(guò)抑制p53在MMP－2啟動(dòng)子上的結(jié)合從而阻斷TGF－β1對(duì)MMP－2的誘導(dǎo)作用。類似的，在主動(dòng)脈弓縮窄（transverse aortic constriction，TAC）動(dòng)物體內(nèi)抑制Meg－3后可以阻止心肌MMP－2的表達(dá)，導(dǎo)致心肌纖維化減少并改善舒張功能。總的來(lái)說(shuō)，本文揭示了Meg3在體外和體內(nèi)CFs中調(diào)控MMP－2的關(guān)鍵作用，從而發(fā)現(xiàn)了一個(gè)心肌纖維化發(fā)展中新的調(diào)控因子及潛在的心肌重塑新靶點(diǎn)。