文章背景簡介

BACKGROUND INTRODUCTION

血管平滑肌細胞（VSMCS）是一種高度特化的細胞，其主要功能是通過收縮舒張血管、調(diào)節(jié)血流和血壓。VSMCs并不是終末分化細胞，在各種刺激下可以從分化表型轉(zhuǎn)換為去分化表型。VSMCs的表型轉(zhuǎn)化與收縮蛋白減少、細胞外基質(zhì)和炎性細胞因子增加有關(guān)。這種表型轉(zhuǎn)化在高血壓、動脈粥樣硬化、血管再狹窄和糖尿病血管并發(fā)癥的血管重塑中起著重要的病理生理作用。

腎素－血管緊張素系統(tǒng)（RAS）在高血壓的發(fā)生和終末器官損傷中起著關(guān)鍵作用。血管緊張素II是一種強大的血管收縮劑，是導(dǎo)致高血壓的重要因子。血管平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)化被廣泛認為是高血壓患者血管重構(gòu)的關(guān)鍵過程，而大動脈和小動脈的重塑會推進高血壓及其并發(fā)癥的發(fā)展。血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）誘導(dǎo)的血管收縮和血管平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)化與高血壓有著密切的關(guān)系。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（如卡托普利）或血管緊張素受體拮抗劑（如氯沙坦）等血管緊張素II阻斷藥物可減輕高血壓，并對高血壓產(chǎn)生有益的器官保護作用。此外，慢性低度血管炎癥已被認為在人類和實驗?zāi)Ｐ透哐獕旱陌l(fā)生、發(fā)展和進展中起著至關(guān)重要的作用，而眾所周知，Ang II是一種強大的促炎介質(zhì)，它會刺激生產(chǎn)炎癥細胞因子，并通過AT受體引起氧化應(yīng)激，進而影響血管系統(tǒng)、腎臟和大腦、促進高血壓。

炎性小體（inflammasome ）是由多種蛋白質(zhì)組成的復(fù)合體，分子量約700 KDa，此概念由Tschopp研究小組于2002年首次提出。炎性小體能夠調(diào)節(jié)胱冬肽酶－1（caspase－1）的活化進而在天然免疫防御的過程中促進細胞因子前體pro－IL－1β和pro－IL－18的成熟和分泌，此外炎性小體還能調(diào)節(jié)caspase－1依賴的形式編程性細胞焦亡（pyroptosis），誘導(dǎo)細胞在炎性和應(yīng)激的病理條件下死亡。目前已發(fā)現(xiàn)的炎性小體主要有5種，即NLRP1炎性小體、NLRP3（NLRP是NACHT， LRR and PYD domains－containing protein ，核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白）炎性小體、NLRC4炎性小體、IPAF炎性小體和AIM2炎性小體。

NLRP3（NLR family pyrin domain containing 3 ）通過凋亡相關(guān)斑點樣蛋白（ASC）募集半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶－1（caspase－1）前體，形成炎性反應(yīng)復(fù)合體，活化pro－caspase－1，進一步對IL－1β、IL－18等細胞因子的前體進行加工和剪接，從而促進它們的成熟和分泌，引發(fā)炎癥反應(yīng)。

研究發(fā)現(xiàn)，高血壓患者血漿和血管中的炎癥細胞因子IL－1β和IL－18會增加。炎性小體對于小鼠腎臟／脫氧皮質(zhì)酮醋酸鹽／鹽誘導(dǎo)的高血壓是必不可少的。硫化氫通過抑制TLR4／NF－κB通路及其下游NLRP3炎性小體激活來抑制高葡萄糖誘導(dǎo)的心肌細胞炎癥。在小鼠中敲除NLRP3基因后可以阻止Ang II誘導(dǎo)的高血壓，而ASC缺失小鼠則不能，這表明NLRP3對妊娠高血壓的誘發(fā)作用是獨立于ASC介導(dǎo)的炎性小體而發(fā)揮的。然而，目前尚不清楚NLRP3是否參與了Ang II誘導(dǎo)的室間隔細胞表型轉(zhuǎn)化、增殖以及血管重構(gòu)。為探討NLRP3在Ang II誘導(dǎo)的炎癥、VSMCs表型轉(zhuǎn)化與增殖以及NLRP3敲除小鼠和野生型小鼠血管重構(gòu)中的作用，南京醫(yī)科大學(xué)Xing－Sheng Ren等人展開了研究，并于2017年在《Cell Physiol Biochem》雜志上（IF2017＝ 5．5；醫(yī)學(xué)2區(qū)）發(fā)表了題為“NLRP3 Gene Deletion Attenuates Angiotensin II－Induced Phenotypic Transformation of Vascular Smooth Muscle Cells and Vascular Remodeling”的文章。

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所用到的主要方法

METHODS

1．蛋白質(zhì)印跡分析

2．免疫組化

3．cck－8試劑盒

4．EDU摻入分析法

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文章主要內(nèi)容摘要

ABSTRACT

目標：血管緊張素（Ang）II在高血壓的血管炎癥和重塑中起著重要作用。血管平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)化是血管重構(gòu)的主要啟動因子。本研究旨在確定NLRP3炎癥激活在血管緊張素II誘導(dǎo)的血管平滑肌細胞表型轉(zhuǎn)化和血管重構(gòu)中的作用。

方法和結(jié)果：細胞實驗主要采用AngⅡ處理來自NLRP3敲除小鼠和野生型小鼠的原代血管平滑肌細胞24小時。動物模型是利用滲透性微泵皮下輸注AngⅡ2周，誘導(dǎo)WT和NLRP3－／－小鼠發(fā)生血管重構(gòu)和高血壓。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在原代血管平滑肌細胞中，NLRP3基因缺失可減弱AngⅡ誘導(dǎo)的NLRP3炎癥激活、收縮表型向合成表型的轉(zhuǎn)化以及細胞增殖。在NLRP3－／－小鼠中，Ang II誘導(dǎo)的高血壓和WT小鼠的血管重構(gòu)也都呈現(xiàn)為減弱。此外，在NLRP3－／－小鼠的主動脈中，Ang II誘導(dǎo)的NLRP3炎癥激活、表型轉(zhuǎn)化和增殖細胞核抗原（PCNA）上調(diào)也都受到了抑制。

結(jié)論：NLRP3炎性小體激活有助于血管緊張素II誘導(dǎo)的室間隔細胞表型轉(zhuǎn)化與增殖、并促進血管重構(gòu)和高血壓。